FUS-50L(A)發酵罐使用前準備(v1.1.0.0)
2.1 目的
保障發酵罐具有良好氣密性,使用前電極和稱重的校準。
2.2 罐蓋的拆裝與罐體清洗
2.2.1 開罐
取消所有自控。
取下所有補料連接。
確認攪拌電機電源關閉。
斷開電機電源和測速連接線,擰下電機固定螺絲妥善保存,小心取下電機放置于安全地方,保存好所有連軸零件。
斷開壓力傳感器連接頭,并取下壓力傳感器(如有)。
擰下視鏡燈固定螺絲,取下視鏡燈,妥善放置視鏡燈和固定螺絲。
斷開排氣冷凝器上端,確認排氣冷凝器進水閥和排氣冷凝器回水閥關閉,斷開排氣冷凝器進回水連接軟管,擰下排氣冷凝器固定并取下排氣冷凝器。
注意:排氣冷凝器進回水軟管斷開時,可能會有殘余水流出。
用扳手擰松所有罐蓋固定螺絲并斷開固定卡扣。
雙手握住罐蓋把手嘗試左右旋轉罐蓋,確認罐蓋和罐體沒有粘連。
兩人分別握住罐蓋兩個把手,同時向上提出罐蓋,倒放或者軸斜向上側放于地面。
注意:提出罐蓋時,可以抓握罐蓋把手、罐蓋邊緣以及電機固定底座,嚴禁抓握攪拌軸。放置罐蓋時,嚴禁攪拌軸作為支撐受力。
2.2.2 清洗
清洗攪拌軸,如有需要將槳葉拆下清洗。
注意:拆槳葉注意槳葉固定螺絲妥善放置,槳葉固定螺絲孔及螺絲可根據需要進行清洗、水煮或者超聲清洗。
清洗罐蓋內側。
取下罐蓋上所有補料接口、接種口,根據需要清洗。
清洗排起冷凝器內殘留。
清洗罐內壁、空氣分布管。
如有需要、拆下擋板進行清洗。
清洗工具可以使用毛刷、抹布、百潔布,禁用鋼絲球。
注意:使用百潔布清洗不銹鋼也會導致不銹鋼表面拋光精度變化,但是并沒有證據表明會對細菌、真菌、酵母、放線菌培養造成影響。
注意:清洗要在罐內滅活后進行,防止微生物對環境造成污染;對于排污和排水不分離的產品,不建議直接將帶有發酵液的污水直接通過排污管道排放。
2.2.3 安裝
確認罐體內擋板安裝。
將清洗干凈的空氣分布管復位。
注意:O型密封圈不要遺忘。
確認攪拌槳安裝到需要的位置,并確保安裝牢固。
兩人分別握住罐蓋兩個把手,接種口朝向外側,小心的將罐蓋舉起,保證攪拌軸不與罐體邊緣、內壁等發生碰撞或者摩擦,將罐蓋放置與罐體上。
小心的旋轉或者挪動罐蓋,使得接種口朝向需要的位置、罐蓋和罐體邊緣對齊。
連接并用手預擰緊所有卡扣。
用固定或者活口扳手擰緊第一顆螺絲,然后按照“上一個固定螺絲對位->上一個固定螺絲對位的逆時針臨位”的循環順序緊固所有固定螺絲。
注意:手握扳手靠近開口側,可以減小力矩,更有利于感知螺絲擰緊的程度;每次擰緊建議不超過1/4圈,感覺到阻力突然變大即可,按順序擰緊直到所有螺絲感覺沒有空隙即可。
注意:過度壓緊會導致罐蓋密封圈壓碎,影響使用壽命。
更換使用過的補料膠塞、確認補料過渡壓帽下都有完好的補料膠塞;徒手擰緊補料過渡壓帽,徒手將補料蓋堵頭擰到底即可,不需擰緊。
以電機連接線朝向為參考,將電機軸末端凸起與攪拌軸上端凹槽方向轉到大概一致;小心的將電機放在底座上,并確認將電機軸末端的凸起插入攪拌軸上端凹槽。
對準電機和底座的螺絲孔,將固定螺絲擰緊。
注意:螺絲對稱擰緊。
安裝排氣冷凝器和排氣管道。
安裝視鏡燈、壓力傳感器(如有)及電纜;安裝攪拌電機供電和測速電纜。
短暫低速啟動攪拌電機,確認電機正常運轉且沒有異響和過度的震動。
2.3 氣密性檢測
2.3.1 補料膠塞檢查、更換
檢查罐蓋上所有補料膠塞,更換使用過和漏氣的補料膠塞。
徒手擰緊補料過渡壓帽和補料蓋堵頭。
注意:由于補料膠塞比較厚,補料過渡壓帽徒手擰緊即可,正常使用不需要工具。
注意:補料蓋堵頭旋到底即可,不需擰緊,否則可能會導致蒸汽滅菌后不易打開,或者旋出過程中帶動補料過渡壓帽。
2.3.2 易磨損O型密封圈檢查
檢查罐底取樣閥O型密封圈,破損的O型密封圈會使罐底密封不嚴,如果罐底O型密封圈斷裂,會使得密封徹底失效。
全開罐底閥。
用內六角扳手擰松罐底閥固定環的固定螺絲。
逆時針(從下向上)擰下罐底閥固定環,取出罐底閥。
檢查罐底閥上O型密封圈是否有損傷,更換損傷O型密封圈。
將罐底閥裝回并擰緊罐底閥固定環。
擰緊罐底閥固定環的固定螺絲。
注意:罐底的密封是靠O型密封圈填充底閥軸和底閥內壁密封,關到底即可,用力擰對密封沒有效果,可能會損壞底閥或者密封圈。
注意:罐底閥使用過程中必須保證罐底閥固定環的固定螺絲正常擰緊,否則罐底閥固定環會有脫落的風險,可能會造成罐內發酵液泄露甚至人身傷害。
檢查空氣分布管連接罐體處密封O型密封圈,壓扁或者破損會導致部分氣體在此處泄露,造成有效通氣量與預計不符的實驗偏差。
擰下空氣分布管固定環,取下空氣分布管。
O型密封圈位于空氣分布管罐體側連接處,根據需要更換此O型密封圈。
將空氣分布管下端裝入位于擋板上的限位槽內,上端對準連接處擰緊固定環。
檢查護套內O型密封圈,此O型密封圈隔離了電極在罐內無菌部分和非無菌部分。
用小的一字螺絲刀或者牙簽取出護套內O型密封圈。
將新的O型密封圈塞入護套內腔。
用小的一字螺絲刀或者牙簽將O型密封圈放入護套內腔凹槽。
注意:破損會導致發酵液進入電極和護套之間的縫隙,形成滅菌死角。此外,發酵液會導致電極和護套內壁的粘連,在取出電極的時候可能會損壞電極。
注意:由于電極末端O型密封圈的作用,此O型密封圈破損可能不會導致罐內液體滲出,因此,保壓測試可能不能發現此O型密封圈的破損;通常情況下,根據電極插拔的阻力可以判處此O型密封圈的狀態,或者定期進行更換(根據使用頻率用戶自行確定,一段時間未使用后建議更換)。
注意:如果電極被粘連難以取出,按照2.4.3 注意提示操作。
其他需要注意的O型密封圈:護套外O型密封圈、尾氣冷凝器兩端和尾氣冷凝器進水、回水接口處O型密封圈。
2.3.3 過濾系統氣密性檢測
檢查過濾器系統連接和閥門是否漏氣。
關閉空氣進罐隔膜閥、過濾器排冷凝水閥、隔膜閥前排凝閥、蒸汽進過濾器閥。
打開空氣進過濾器閥向過濾器通入空氣至達到總管壓力(通常不低于0.2MPa)。
關閉空氣進過濾器閥,緩緩打開隔膜閥前排凝閥,使得過濾器內壓力下降到0.2Mpa后關閉。
觀察過濾器上方壓力表讀數變化。
如果壓力升高,說明空氣進過濾器閥門泄露,更換并確認此閥門正常后繼續下一步。
如果壓力下降,說明后端管路或閥門有漏氣點。用肥皂水檢查過所有接頭,擰緊或更換漏氣接頭;拆開過濾器排冷凝水閥靠近排污管路檢查閥門密封情況,如果閥門關不死,立即更換;如果以上問題都排除,檢查空氣進罐隔膜閥,并考慮更換膜片。
重復這一過程直到壓力在2小時內沒有發生可見的變化。
注意:連接排污的閥門一旦漏氣極易污染。
2.3.4 罐體氣密性檢查
完成上述檢查后,確認罐底閥關閉、向罐體內加入1/2到2/3的水,關閉排氣控制閥、在線尾氣分析取樣閥。
向罐內通入空氣,加壓至0.1MPa左右。
關閉空氣進罐隔膜閥,觀察壓力變化情況。
如有明顯下降,根據漏氣聲音或用肥皂液檢查進、出氣管路閥門的接口與閥門、罐蓋與接插件等處可能的泄漏點,排氣至常壓后加以處理,重復以上步驟直至罐壓2小時內無明顯下跌。
注意:嚴禁空罐加壓,一旦電極或其他部件射出,將會非常危險。
2.4 電極檢查和標定
2.4.1 電極使用前檢查
檢查pH電極玻璃電極是否有裂痕、電解液是否嚴重變色。
檢查DO電極電極膜是否完好、電解液是否充足。
2.4.2 電極的活化
上電12小時以上,pH電極浸入飽和的KCl,DO電極浸入水中。
注意:如果不進行活化,電極在使用過程中會有較大漂移。
2.4.3 電極標定
pH電極標定均為兩點緩沖液標定,根據所控制的pH選擇兩種不同pH的緩沖液。
電極標定界面輸入兩種緩沖液的pH值。
將緩沖液恢復至室溫溫度。
將pH電極插入一種緩沖液中,待數值穩定,按下對應的確認鍵。
用去離子水清洗電極表面并用吸水紙沾干,將電極浸入另一種緩沖液中,帶數值穩定后,按下對應的確認鍵。
DO電極零點標定在滅菌階段,滿度標定在種前。
安裝電極,安裝過程中電極變送線不要取下。
注意:電極和護套以及護套和罐體接口之間密封均為O型圈密封,擰緊電極或者護套均不能增加密封程度。過度擰緊會損壞設備,此處擰緊禁止使用工具。pH電極難以從護套中徒手擰出,可能是O型圈被料液黏住,用熱水浸泡一段時間嘗試徒手擰出,如需借助工具必須十分緩慢用力。DO電極擰入護套要始終向擰緊方向,如需擰出,一定要用手捏住電極尾部,不能讓整個電極隨之轉動,否則可能將電極帽擰松或者擰開。
2.5 罐重標定
2.5.1 斜率標定
確認罐內無料液或水、溫控關閉、夾套進排水閥門、夾套蒸汽進排閥門關閉。
進入罐重標定界面。
按下第一個確認按鈕,將此時罐重標為0。
小心將兩個10kg砝碼放在罐蓋上,待罐重讀數穩定后,按下第二個確認按鈕,標定斜率。
小心取下砝碼。
將發酵過程中所有電極及附件安裝就位。
打開夾套進排水閥門,控制面板上設置溫控為手動冷卻。
當罐重顯示穩定后,點罐重標定界面上去皮按鈕。
關閉溫度控制冷卻。
注意:取放砝碼要小心,防止砝碼跌落傷人。
注意:罐重斜率無需經常標定,通常情況下連續使用只需要去皮操作。
2.6 補料稱標定
確認稱面上無任何物品。
點擊對應稱標定界面標定零點按鈕。
小心將兩個4kg砝碼置于稱面,讀數穩定后按下標定滿度按鈕。
按照以上方法完成其他所有稱的標定。
2.7 補料累計清零
依次進入設置?pH、消泡、補料。按下累計值旁邊的R按鈕清零累計量。